Растворы антибиотиков можно сохранять не больше недели и добавлять в агар, нагретый до 50°. Желательно, чтобы эти среды после добавления антибиотиков (особенно актидиона) были применены сейчас же или не позднее, чем через несколько дней после хранения их в рефрижераторе.
Добавление пенициллина к питательным средам не рекомендуется, так как иногда этот антибиотик задерживает рост бруцелл.
Все питательные среды перед употреблением должны быть тщательно проконтролированы путем засева на них свежевыделенных культур бруцелл, но не старых, длительно выращиваемых на средах лабораторных культурах. Таким образом, для выделения бруцелл из материалов с большим содержанием в них возбудителя посев рекомендуется производить на -твердые питательные среды, а при исследовании загрязненных материалов к твердым средам следует добавлять краски и антибиотики. При загрязнении посевов подозрительные на бруцелл колонии отвиваются сразу после их обнаружения. Материалы с малым количеством бруцелл засеваются на жидкие питательные среды. Начиная с 5-6-го дня через каждые 3-4 дня из бульона производятся высевы на твердую среду. Если на протяжении месяца инкубации выделить культуру не удается, исследование считается законченным с отрицательным результатом.
Необходимо помнить, что бруцеллы в жидкой среде быстрее диссоциируют, а потому бывают случаи, когда выделенные из бульона культуры по своим свойствам не соответствуют тем, которые имелись in vivo. По материалам Вейбриджского центра, при выращивании бруцелл в жидких средах в термостате при непрерывном покачивании диссоциации бруцелл не наблюдается и, кроме того, выращивание в этих условиях стимулирует рост бруцелл.