Второй краситель после предварительного промывания препарата водой перекрашивает все клетки, кроме бруцелл, в зеленый цвет. Бруцеллы же вследствие своей особенности остаются красными. Безусловно, при этом методе окраски нужно точно оттитровывать экспозиции, в особенности при окраске вторым красителем. Увеличение времени контакта клеток бруцелл со вторым красителем способствует перекрашиванию и бруцелл.
При этом способе можно менять красители, т. е. первой краской взять 3% раствор малахитгрюна и второй краской- 1% раствор сафранина. Тогда бруцеллы будут окрашены в зеленый цвет, а посторонняя микрофлора — в красный.
R бруцеллезной лаборатории Института эпидемиологии и микробиологии имени Н. Ф. Гамалеи АМН СССР этот метод окраски бруцелл применяется широко, но с некоторой модификацией, а именно: красители — сафранин (первая краска) и малахитгрюн — применяются в меньшей и одной и той же концентраций — 0,5%. При этой концентрации Оруцеллы хорошо окрашиваются в розовый цвет. Данный метод окраски применяется при окрашивании как препаратов с чистой культурой бруцелл, так и мазков крови для определения опсонофагоцитарного индекса и мазков-отпечатков.
Наряду с описанным методом предлагаются и другие методы окраски, в частности метод Имандзуми (1954). Этот метод основан на некоторой кислотоустойчивости бруцелл. Препарат фиксируют формалином и окрашивают раствором фуксина на анилиновой воде в течение 30 минут при комнатной температуре, после чего препарат промывают водой и обесцвечивают уксусной кислотой (1:500) до пожелтения. Затем промывают водой вторично и докрашивают метиленовой синькой. Бруцеллы окрашиваются в бледно-голубой цвет, а вся остальная флора принимает синюю окраску.
КУЛЬТУРАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА БРУЦЕЛЛ И ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ