Это явление объясняется тем, что бактериофаг действует не на все клетки в популяции культуры, и часто даже на твердой среде на месте нанесения бактериофага на газон культуры можно обнаружить не стерильную зону, а только зону разной степени ослабленного роста культуры. Поэтому в жидкой среде заметного лизиса не наблюдается вследствие нарастания мутности за счет размножения не пораженных фагом бруцелл.
Отдельные расы бактериофага, в особенности расы, адаптировавшиеся к определенной культуре — кормиле, становятся способными вызывать лизис и бульонной культуры этого штамма.
3. Активность бактериофагов может быть усилена при последовательном пассировании на чувствительной культуре (массирование фагов можно проводить различными методами — в жидкой среде и на полужидком агаре).
4. Бруцеллезные фаги проявляют большое непостоянство в своей литической активности. При одних и тех же условиях посева на параллельные чашки результаты могут быть не идентичны.
Большое значение имеет плотность агара, влажность среды, рН и прочее. Так, влажные мягкие (1,1%) агаровые среды способствуют лучшей диффузии бактериофага и лучшему действию его и, наоборот, 4-5% агаровые среды рекомендуются для очищения культуры от свободного фага.
5. Бруцеллезные фаги при посеве на чашки с агаром в смеси с культурой способны давать стерильные пятна, причем образующиеся стерильные пятна могут быть разной величины и формы — крупные, мелкие, точечные, овальные и круглые.
Некоторые более вирулентные расы бруцеллезного фага при высеве с чувствительной культурой по методу Грациа (Gratia) на двухслойном агаре образуют хорошо видимые «бляшки»-стерильные пятна — колонии фага, по числу которых можно легко определить концентрацию фаговых корпускул в 1 мл материала.