К ним относятся следующие: 1) применение тщательно проверенных красок, подтитрованных по эталонным культурам; 2) стандартная питательная среда; 3) определенная доза засеваемой культуры (в пробирку засевают одну стандартную петлю диаметром 2 мм из 1 млрд. взвеси культуры по установленному оптическому стандарту мутности).
В сомнительных случаях рекомендуется засевать разные количества культуры — по одной петле из взвеси 500- 100 млн., что может дать более четкую характеристику ее. Кроме того, рекомендуется также производить засев испытуемой культуры на среды с разным содержанием красителя для определения диапазона бактериостатического действия последнего.
Все перечисленные выше методы дифференциации бруцелл на протяжении уже многих лет прошли основательную апробацию и по праву относятся к классическим методам.
Однако за последние годы были предложены и другие методы, позволяющие дифференцировать отдельные типы бруцелл. Так, Рену в 1952 г. предложил метод дифференциации, основанный на применении диэтилдитиокарбоната натрия. Это вещество оказывает различное бактериостатическое действие на разные типы бруцелл, образуя в бактериальных колониях зоны роста и подавления, характерные для каждого вида.
Оценка указанного метода разными авторами различна. Так, Морелли при дифференциации этим методом 35 штаммов разных типов бруцелл у 33 получил совпадение с классическими методами дифференциации. Таргани и Доннини (1954) также положительно оценивают этот метод дифференциации. В то же время Бруни и Де Фелип приходят к выводу, что метод Рену мало пригоден для надежного определения типа бруцелл, так как при зтом методе затруднительно выявлять зоны роста и бактериостаза.