Рост бруцелл в полужидком агаре появляется чуть ниже верхней поверхности среды в виде незначительного помутнения, в дальнейшем образуется диффузное помутнение верхних слоев среды и пленка на ее поверхности. Интенсивность роста обозначают крестами по трех- или четырехкрестовой системе. Кроме описанного выше способа дифференциации-бруцелл по краскам, применяются также следующие методы: метод Круикшанка, Пиккета, 1952,. метод, рекомендованный в 1952 г. вторым совещанием комитета экспертов, и др.
Метод Круикшанка. Стерильные полоски фильтровальной бумаги (6X0,5 см) пропитываются красками и высушиваются. Концентрации красок применяются следующие: 1 : 600 для тионина и 1 : 1200 для основного фуксина. Полоски фильтровальной бумаги располагаются параллельно на одинаковом расстоянии друг от друга на дне чашки Петри и заливаются 12 мл растопленного и остуженного до 50° печеночного агара. На изготовленную таким образом и подсушенную среду засеваются петлей перпендикулярно полоскам бумаги густые взвеси испытуемых и эталонных культур бруцелл. Посевы устанавливаются в термостат и через-2-3 дня измеряется степень задержки роста.
Метод Пиккета. При этом методе применяются таблетки, которые содержат соответствующие дозы красок, позволяющие достигнуть наиболее подходящие концентрации их. Эти таблетки включены в Albimi-arap; посев культуры производится путем засева, штрихами сверху агара, в который включены таблетки. Чувствительность красок отмечается путем измерения зоны угнетения роста в миллиметрах от края таблетки до границы роста культуры.
Метод, принятый на втором заседании комитета экспертов Всемирной Организации Здравоохранения. К растопленной агаровой среде добавляются краски в таком количестве, чтобы получить необходимую концентрацию их; затем эту среду разливают в чашки Петри и подсушивают. Из 48-часовой культуры с твердой среды, не содержащей красок, готовится суспензия путем эмульгирования одной петли культуры в 0,1 мл солевого раствора. Одна петля этой эмульсии засевается штрихом на поверхность агара, на один из сегментов чашки. На чашку можно засеять одновременно 4-6 культур.