Некоторые штаммы начинают расти в обычных аэробных условиях уже начиная со второй перевивки, тогда как другие — лишь после многочисленных пересевов. Необходимо также иметь в виду, что иногда первые генерации Br. abortus удаются в обычных аэробных условиях. Например, 60% из 600 культур Вг. abortus, выделенных во Франции, росли в первых своих генерациях без углекислоты. Эти небольшие отклонения имеют место преимущественно у диссоциированных культур.
Отметим, что встречаются также культуры Br. abortus, которые содержат одновременно колонии, требующие для своего роста присутствия углекислоты и растущие без нее.
Таким образом, по этому признаку можно дифференцировать Вг. abortus от Вг. melitensis и Br. suis, но он не позволяет дифференцировать Br. melitensis от Br. suis.
Кроме того, необходимо учитывать следующее: быстрое привыкание Вг’ abortus к обычным условиям роста и возможность получения в обычных условиях иногда даже первых генераций этих культур указывают на то, что данный признак не является абсолютным. Таким образом, применение метода углекислоты для дифференциации типов группы бруцелл вполне показано, но все же надо помнить, что он является относительным.
Для получения необходимой концентрации углекислоты (10%) применяются следующие методы.
1. Посевы помещают в герметически закрывающийся сосуд (эксикатор), куда через кран сосуда добавляют из баллона, используя газометр, углекислоту в количестве 5-10% к объему сосуда.
2. На дно сосуда, в котором установлены посевы, помещают двууглекислую соду из расчета 0,35 г на 1 л объема сосуда и на некотором расстоянии от соды ставят стаканчик с таким же количеством соляной кислоты, после этого сосуд плотно закрывают и осторожно покачивают, причем кислота должна вылиться на соду. В результате этого и выделяется необходимое количество углекислоты.