Следует также иметь в виду, что некоторые этапы функции генома вирусов, а именно макромолекулярный синтез в зараженных клетках и сборка вирусов, у ts-мутантов отличаются от дикого типа. Этот плейотропный эффект также связан со специфическими свойствами ts-мутантов, а именно: 1) частичным блоком мутантной функции, т. е. ликостью; 2) с тем, что мутация на самом деле может быть плейотропной и прямо задевать множество вирусных функций; 3) способностью некоторых мутаций вызывать альтернативный путь функционирования; 4) возможным содержанием в мутанте множественных мутаций, блокирующих более чем одну функцию (Ramig, 1985).
Для использования ts-мутантов в качестве инструментов генетического и биохимического анализа важно знать, являются ли они одиночными или мутантный фенотип создан из разных независимых нелетальных мутации. D. Dargan и J. Subak-Sharpe (1984) считали возможным определить это анализом нетермочувствительных ревсртантов, если их можно получить из ts-мутантов. Для этого они выбрали 19 ts-мутантов вируса простого герпеса, индуцированных БДУР. Многие эти мутации картированы как генетически, так и физически. Полипептидиый профиль инфицированных клеток показал, что у большинства мутантов мутация затрагивает синтез более одного полипептида. У пяти изученных мутантов не удалось выделить нетермочувствительные ts-ревсртанты. Принято, что они носят множественные мутации. У ревертантов, выделенных от остальных 14 ts-мутантов, определена степень полноты мутационных преобразований. В качестве критерия такой оценки избрано сравнение их поведения с поведением дикого типа в трех типах опытов, проводимых при пермиссивной (31 °С) и непермиссивной (38,5 °С) температуре: 1) установление кривой репликации вирусов; 2) испытание активности трех вирус-специфичных ферментов, а именно тнмидинкиназы, ДНК-полнмеразы и щелочной эндонуклеазы; 3) изучение полииептидного профиля зараженных клеток в SDS — ПААГ.