Дифференциация типов бруцелл по редуцирующей способности анилиновых красок (бактериостатический метод)
Наиболее точные результаты наблюдаются при дифференциации типов бруцелл бактериостатическим методом, который основан на неодинаковой способности различных типов бруцелл редуцировать анилиновые краски.
При дифференциации бактериостатическим методом применяют четыре краски: основной фуксин, тиопин, пиронин и метилвиолет. Основной фуксин, пиронин и метнлвиолет задерживают рост только Br. suis; тнонин задерживает размножение только Br. abortus. Br. melitensis растет в присутствии всех четырех красок. В широкой практике обычно применяют только две краски — фуксин и тионин.
Правильность результатов дифференциации этим методом зависит от ряда условий — качества среды, активности и концентрации красок в среде и количества засеянных в среду с красками бруцелл.
Среда. Для дифференциации по краскам наиболее широко применяют модифицированную бруцеллезной лабораторией Института эпидемиологии и микробиологии имени Н. Ф. Гамалеи АМН СССР полужидкую среду Майер-Цобеля (0,2% агара, рН=6,8-7,0) и твердую печеночную среду.
Твердый агар используют в тех случаях, когда необходимо производить дифференциацию одновременно с выделением культур из организма экспериментального животного (при изучении иммунитета). В этих случаях по предложению П. Ф. Здродовского посев из органов и лимфатических узлов животных производят параллельно на обычные питательные среды и на дифференциальные. Учет роста этих посевоз дает возможность сразу определить типовую принадлежность выделенных культур. При проверке точности данного метода бруцеллезной лабораторией Института эпидемиологии и микробиологии имени Н. Ф. Гамалеи АМН СССР оказалось, что ошибка возможна не более чем в 0,88% случаев. Эта ошибка может иметь место при очень скудном росте на обычном агаре, в таких случаях рекомендуется производить повторную дифференциацию с высеянной из бульона агоровой культурой.